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一种质粒及其构建方法和在艾滋病毒载量测定上的应用

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项目类型: 可推广技术产品
项目单位名称: 中国科学院昆明动物研究所 (查看联系信息)
专利状况: 授权专利 专利(申请)号:00131603.6
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技术(产品)用途介绍:

 一种质粒及其构建方法和在艾滋病毒载量测定上的应用,属艾滋病防治领域。质粒为pSPgag737/JM109 CGMCC NO.0486。构建方法是将HIV-1前病毒DNA进行Sal I/sac I双酶切,与被同样双酶切的pSP64Poly(A)质粒发生粘性末端连接,得到含有HIV-lgag 基因片断的pSPgag737重组质粒,转化至JM109感受态细胞,经酶切/PCR鉴定,得到阳性克隆子。体外转录阳性克隆子,获得病毒载量定量测定的RNA外参照,将PCR技术与Kodak电泳图谱分析系统相结合,建立了HIV感染者和艾滋病人血浆病毒载量的定量测定方法。本发明操作简单,价格便宜,特异性好,灵敏度高,可重复性好,作为艾滋病的科学研究与防治的工具。